01.1 - Graduação (Sede)

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    Hospedabilidade de Meloidogyne em plantas medicinais
    (2018) Xavier, Gustavo Henrique Veloso de Barros; Carvalho, Rejane Rodrigues da Costa e; http://lattes.cnpq.br/3307316028992311; http://lattes.cnpq.br/2716877925155096
    Atualmente os fitonematoides constituem um dos principais fatores limitantes à produtividade, e têm causado grandes preocupações na sanidade e qualidade na produção de plantas medicinais. Dentre eles, destacam-se pelo parasitismo as espécies do gênero Meloidogyne, popularmente conhecidas como nematoides-das-galhas, sendo uma forma de controle eficaz o uso de cultivares resistentes. O objetivo do presente trabalho é encontrar nos genótipos estudados via germinação de sementes fontes de resistência ao Meloidogyne spp. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, o delineamento experimental foi blocos casualizados, com onze tratamentos e quatro repetições. Para avaliação da resistência de onze espécies medicinais ao nematoide-das-galhas, inicialmente utilizou-se o inóculo de Meloidogyne enterolobii, Meloidogyne incognita e Meloidogyne javanica. Aos 21 dias após a semeadura, foi feita a infestação do substrato com os ovos do nematoide, na concentração de 2000 ovos/célula, a suspensão de ovos foi aplicada diretamente no substrato. Aos 45 dias após a infestação foi avaliada a variável número de galhas (NG) no sistema radicular e posteriormente determinado o Fator de Reprodução (FR). Os dados obtidos foram submetidos ao teste de Scott Knoot a 5% de probabilidade. De acordo com a análise estatística, as espécies medicinais foram divididas em seis grupos considerando o índice de galhas, cujos valores variaram de 1,65-2,07 a 9,68-10,33. Os menores valores correspondem à arruda e sálvia, as quais foram classificadas como resistente e altamente resistente, respectivamente. Por outro lado, os maiores valores correspondem ao manjericão verde e rubi, ambos classificados como altamente suscetíveis. Tal variável é uma manifestação sintomática ocasionada pelo parasitismo do nematoide. Para o fator de reprodução, houve diferença significativa entre as espécies, as quais formaram três grupos. Sendo o grupo 3 foi composto por cinco espécies, cujos valores de FR foram baixos, dentre elas apenas o coentro foi classificado como suscetível. Por outro lado, a salsa, a erva-doce, a arruda e a sálvia apresentaram FR<1, sendo classificadas como resistentes ao M. enterolobii, assim, tais espécies são consideradas fontes de resistência ao nematoide.
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    Avaliação e seleção de progênies F2:4 de alface com resistência ao nematoide-das-galhas e à podridão-mole
    (2024) Lima, Rayhonay Souza Rodrigues de; Pereira, Jacqueline Wanessa de Lima; http://lattes.cnpq.br/1563969275190315; http://lattes.cnpq.br/3453832325160775
    A alface é a hortaliça folhosa mais cultivada no mundo. Entre os principais patógenos que acometem a cultura estão os nematoides-das-galhas (gênero Meloidogyne) e a bactéria Pectobacterium carotovorum (causadora da doença radicular podridão-mole), tais fitopatógenos são recorrentes em áreas agrícolas de Pernambuco. O método mais seguro e eficaz para o controle dos fitopatógenos é o uso de cultivares resistentes. O melhoramento da alface para múltiplas doenças é de grande importância para que a cultura possa ser cultivada o ano inteiro, com o menor percentual de perdas. Assim, o objetivo do projeto é avaliar e selecionar progênies de alface para resistência ao nematoides-das-galhas e podridão-mole para avanço do programa de melhoramento genético da cultura. Foram utilizadas 20 progênies F2:4 de alface pertencentes ao programa de melhoramento da UFRPE. O experimento foi conduzido em casa de vegetação. Para avaliação da resistência ao nematoide-das-galhas, foi utilizada a espécie M. incognita raça 1. Aos 15 dias após a semeadura, foi feita a infestação do substrato com os ovos do nematoide. A suspensão de ovos foi aplicada diretamente no substrato (1500 ovos.célula-1). Aos 45 dias após a infestação foi avaliada a variável número de galhas (NG) no sistema radicular e posteriormente será determinado o Fator de Reprodução (FR). Os dados obtidos serão submetidos ao teste de Scott Knoot a 5% de probabilidade. Considerando a variável NG, as médias das progênies de alface analisadas não diferiram estatisticamente entre si. Para o FR não houve diferença significativa entre as progênies avaliadas, porém, as progênies 568-20, 172-34 e 568-01 destacaram-se por apresentar FR< 1. Para avaliação da resistência à Pectobacterium carotovorum, o experimento será conduzido em condições de casa de vegetação pertencente ao Departamento de Agronomia da UFRPE.
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    Análise da Influência do número de cópias na expressão do gene blaKPC
    (2021-03-05) Oliveira, Michelly Maria Pereira e; Almeida, Anna Carolina Soares; http://lattes.cnpq.br/4153747599532886
    As enterobactérias tem se destacado na prática clínica pela detecção de mecanismos enzimáticos que conferem resistência a antimicrobianos, destacando-se a Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) devido a sua rápida disseminação mundial ocasionada pela localização do gene blaKPC em grandes plasmídios transferíveis e transposons. A expressão do gene blaKPC pode ser afetadas por características intrínsecas do hospedeiro que o abriga ou número de cópias. Um fenótipo não usual foi observado em isolados clínicos de P. stuartii e M. morganii e seus respectivos transformantes, onde as células de E. coli receptoras de plasmídeos que carregavam o gene blaKPC, apresentaram valores de CIMs, para alguns beta-lactâmicos, maiores do que nos isolados clínicos. O objetivo deste trabalho foi analisar o número de cópias do gene blaKPC, relacionando-os com seus os respectivos CIMs. O DNA genômico dos isolados bacterianos foi extraído a partir do kit PromegaTM WizardTM Genomic DNA Purification conforme orientações do fabricante, e em seguida, foi quantificado por espectofotometria através do equipamento NanoDropTM Lite da Thermo Fisher Scientific. Os genes de controle endógenos foram escolhidos a partir da literatura depois de uma busca robusta, em seguida foram analisados in silico. Utilizando bancos de dados, softwares e outras ferramentas, os primers foram desenhados. Para a realização da quantificação absoluta, foi realizada uma estimativa baseada em uma proporção da relação quantitativa relativa entre alvo e o controle endógeno, utilizando a fórmula 2-ΔCq. Para os experimentos foi utilizando o equipamento SteponeTM Real-time PCR System (Applied Biosystems) e o corante SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems). Os primers desenhados passaram por uma etapa de validação visando avaliar sua eficiência (tufMm - 93.019, tufPs - 90.228 e tufKp - 103.474, ambos com R2próximos de 1). Os dados gerados pelos experimentos de qPCR absoluta foram associados com os distintos perfis fenotípicos observados e a partir dos ensaios foi determinado que o número de cópias do gene blaKPC para os isolados transformantes e para os isolados clínicos não variam significativamente, apontando que outro mecanismo deve estar interferindo na expressão do gene blaKPC, influenciando diretamente os níveis de resistência.