Navegando por Assunto "Bacillus thuringiensis"

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Avaliação da produção de endotoxinas por Bacillus thuringiensis cultivado com substratos agroindustriais
(2019-12-13) Freitas, Lívia Santos de; Porto, Ana Lúcia Figueiredo; http://lattes.cnpq.br/4989617783837981; http://lattes.cnpq.br/3952630035656313
Em contrapartida ao uso exacerbado de pesticidas químicos, o controle biológico de pragas não acarreta danos socioambientais, além de ser altamente específico e eficiente. Um dos agentes biológicos amplamente utilizado é a bactéria Bacillus thuringiensis (Bt), que se caracteriza por produzir cristais proteicos, denominados de delta-endotoxinas, que apresentam alta toxicidade e especificidade para vários membros de Lepidoptera, Diptera, Coleoptera. Bt pode ser cultivado em diferentes tipos de meios de cultura, sendo fundamental a utilização de substratos menos onerosos a fim de baratear o produto final. Assim, visando desenvolver meios de cultura de baixo custo, o presente trabalho utilizou o extrato de palma forrageira (Opuntia), o xarope de sorgo (Sorghum) e o soro de leite como substratos alternativos para o cultivo de B. thuringiensis var. berliner 370 (Btb370). A necessidade de suplementação de nitrogênio foi avaliada através da adição de ureia 1 g/L. O meio de cultura Luria-Bertani líquido foi usado como meio de controle. Os meios de cultura foram submetidos a agitador rotativo a 200 rpm, 30 °C por 96 horas e foram avaliados o crescimento celular e a produção de delta-endotoxinas, esporos e proteases por Btb370. Além disso, houve também a análise morfológica dos cristais proteicos de Btb370 através de microscopia eletrônica de varredura. Observou-se que o meio à base de soro de leite sem a adição de ureia 1 g/L foi o que apresentou maior crescimento celular (4,28 g/L) e maior produção de delta-endotoxinas (568,26 μg/mL) e esporos (9,61 x 1010 UFC/mL) pela bactéria, superiores inclusive ao meio de controle. Os meios constituídos por xarope de sorgo e soro de leite sem suplementação de ureia proporcionaram os maiores valores de atividade proteásica (6013 U/mL e 5962 U/mL, respectivamente). Os meios à base de extrato de palma forrageira não apresentaram produção mensurável de delta-endotoxinas por Btb370. As morfologias dos cristais proteicos observadas foram: bipiramidal, esférica e cuboidal. Desta forma, verifica-se que o soro de leite foi o substrato mais eficiente para o crescimento, esporulação e produção de delta-endotoxinas por Bacillus thuringiensis var. berliner 370.
Desenvolvimento de meios de cultura alternativos para produção de endotoxinas produzidas por Bacillus thuringiensis
(2018-08-27) Oliveira, Débora Pessoa de; Bezerra, Raquel Pedrosa; http://lattes.cnpq.br/1466206759539320; http://lattes.cnpq.br/1037675318692431
O milho é um dos principais grãos da produção nacional, mas a sua produtividade não corresponde a potencialidade. Pragas como Spodoptera frugiperda tem afetado diretamente sua cultura. Nos últimos 50 anos, a forma mais efetiva de controle é o uso de pesticidas químicos que tem apresentado diversos problemas ambientais e de saúde pública. O Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria gram-positiva, esporulante, que possui a capacidade de produzir inclusões cristalinas com ação tóxica contra insetos. Bioinseticidas fabricados a partir de Bacillus thuringiensis são uma alternativa biológica aos inseticidas químicos. O biopesticida é fabricado incluindo os esporos e endotoxinas. Viabilizar o uso de agrosubstratos locais para a produção desta bactéria é uma alternativa para diminuir custos e fornece um produto acessível. O objetivo desse trabalho foi produzir endotoxina por B. thuringiensis utilizando meios alternativos constituído por extrato de palma e líquido metabólico microalgas fotossintetizantes. O B. thuringiensis foi cultivado em meios constituídos por extrato de palma e líquido metabólico do cultivo de Arthrospira platensis (meio A), ou Scenedesmus sp. (meio B), ou Chlorella vulgaris (meio C), ou Dunaliella tertiolecta (meio D). Os mesmos com ou sem a adição de ureia foram colocados em frascos de Erlenmeyer de 50mL contendo 20 mL de meio por 96 horas, 200 rpm e 30°. Foram analisados a densidade óptica (DO), biomassa, número de esporos, quantidade de endotoxinas produzidas e visualização dos cristais de endotoxinas por microscópio eletrônico de varredura. Os meios de cultura constituídos por líquido metabólico de C. vulgaris com e sem ureia, constituído pelo líquido metabólico de Scenedesmus sp. com uréia obtiveram os maiores valores de DO, biomassa, produção de esporos e de endotoxinas, com resultados próximos aos obtidos pelo meio de cultura padrão LB. Esses dados demonstram o potencial dos micro-organismo constituídos por extrato de palma e sobrenadantes de líquido metabólico dos micro-organismos fotossintetizantes para produção de endotoxinas produzidas por B. thuringiensis.